Гистология

Что такое биопсия опухоли

Биопсия опухоли – это наиболее достоверный метод проведения дифференциальной диагностики между доброкачественными и злокачественными новообразованиями.

  После забора клеточного или тканевого биологического материала, проводится его последующее гистологическое или цитологическое исследование под микроскопом.

На данный момент биопсия является обязательным методом исследования при подозрении на злокачественные новообразования.

Проведение биопсии опухолей позволяет с высокой точностью:

• установить этиологию опухоли,
• оценить ее клеточный состав,
• составить прогноз заболевания,
• определиться с тактикой лечения и т.д.

В связи с этим, биопсия опухолей относится также и к важнейшим профилактическим противораковым мероприятиям.

Для получения максимально точного диагноза биопсия проводится в комплексе с другими диагностическими мероприятиями: рентгенологическое исследование, ультразвуковая диагностика, эндоскопические и иммунологические исследования и т.д.

Гистология – что это?

Гистология – область науки, изучающая строение, структуру тканей человеческого организма с помощью микроскопа. Отвечая на вопрос, что изучает гистология, необходимо отметить, что зачастую данное определение используется при обозначении непосредственно самого метода исследования – гистологического анализа. С помощью данного обследования врачам удается:

• подробно изучить структуру видоизмененных клеток;
• определить наличие или отсутствие атипичного строения;
• наличие воспалительного процесса.

Цитология и гистология – в чем отличие?

Нередко пациентов, направляемых на обследование, путают два разных определения: цитология и гистология. Подобные исследования имеют одинаковый процесс забора материала, однако разнятся на этапе самой диагностики. Так, при цитологическом анализе проводится оценка структуры, строения, развития и функциональных особенностей отдельно взятой клетки. С помощью данного метода врачам удается уточнить диагноз и назначить правильное лечение.

Гистология же осуществляет анализ совокупности клеток, составляющих ткань. В ходе диагностики при гистологическом исследования сперва излучается образец забранной ткани, а затем при необходимости могут анализироваться отдельные клеточные элементы. В отдельных случаях цитология применяется в качестве дополняющего метода, помогающего точно поставить диагноз, дифференцировать тип патологии.

Что показывает гистология?

Разобравшись, что такое гистология, необходимо обозначить основные объекты ее исследования. Как было сказано выше, в ходе анализа может изучаться одна из четырех видов тканей человеческого организма:

• эпителиальная;
• соединительная;
• мышечная;
• нервная.

Результаты исследования используются при постановке окончательного диагноза. С помощью правильной расшифровки результатов анализа можно определить:

• нарушение системного кровотока;
• воспалительный процесс;
• тромбоз и внутреннее кровотечение;
• наличие раковых клеток;
• присутствие опухолевидных клеток;
• число и структуру имеющихся метастазов.

Гистология – что это такое в онкологии?

В онкологии гистология – это один из методов исследования, который помогает не только диагностировать наличие злокачественных образований, но и определить их структуру, стадию патологического процесса. Кроме того, анализ на гистологию определяет природу клеточных изменений, доброкачественность или злокачественность. Необходимость процедуры определяется врачом. К примеру, гистологическое исследование щитовидной железы назначается, если узловые образования больше 1 см, а гистология желудка проводится уже при многочисленных эрозивных изменениях слизистой.

Подобное исследование может быть назначено и при:

• внезапном увеличении лимфоузлов;
• изменении размера родимого пятна;
• появлении уплотнений в молочной железе и в других случаях.

Гистология – что это такое в гинекологии?

Данный незаменимый вид лабораторного исследования зачастую назначается женщинам для постановки точного диагноза и назначения терапии. Рассказывая о таком методе, как гистология, что это такое, необходимо отметить, что в гинекологии чаще обследуются образцы тканей, взятые с:

• матки;
• яичников;
• шейки матки.

• постоянных болезненных ощущениях внизу живота;
• длительном кровотечении;
• лейкоплакии шейки;
• подозрении на патологические изменения и новообразования на поверхности внутренних половых органов;
• воспалении шейки матки, яичников;
• исследовании материала после гинекологических операций (выскабливание, удаление полипов, кист).

Результаты гистологии

Ряд данных не обязательно указывает на выявление проблем со здоровьем. Любой специалист, осуществляющий гистологию, перечислит обнаружение каждой ткани, а не только возможные инородные образования. Заключение заполняется на латинском языке, поэтому для его расшифровки нужно обратиться за помощью к доктору. Итоги гистологического анализа пациент получает на руки как письменное заключение. Документ содержит информацию о том, выявлены ли какие-либо патологии в тканях и клетках. Еще в заключении указаны:

• личные сведения о больном;
• какая ткань была взята для исследования;
• место биопсии;
• методика;
• время анализа;
• основная информация по исследованию (указана в конце документа).

Когда показана гистология шейки матки?

Гистологию проводят после первичной диагностики половых органов. Этот метод используют для подтверждения диагноза, который врач заподозрил во время осмотра в зеркалах, проведения УЗИ и кольпоскопии. Исследование позволяет отличить доброкачественные опухоли от рака.

Ткань для исследования забирают методом диагностического выскабливания или аспирационной биопсии. При этом биологические пробы берут из шейки и полости матки. Тест выявляет атипичные клетки и определяет стадию патологического процесса.

Гистологию шейки матки назначают по таким показаниям:

•       признаки патологий во время осмотра в зеркалах;
•       пораженные зоны шейки во время аппаратных исследований (УЗИ шейки матки, кольпоскопия);
•       заражение вирусом папилломы человека (ВПЧ);
•       плохие результаты цитограммы;
•       кератоз плоского эпителия шейки матки;
•       длительное лечение воспаления шеечного канала лекарственными препаратами;
•       проведение полипэктомии;
•       подозрение на лейкоплакию и истинную эрозию;
•       очаги эндометриоза (разрастание эндометрия матки);
•       выявление любых опухолей и наростов цервикального канала;
•       появление признаков дисплазии шейки матки (первые изменения в клетках);
•       внематочная беременность;
•       кровотечения после наступления менопаузы;
•       бесплодие, выкидыши, замершая беременность;
•       нарушения менструального цикла (обильность, изменение цвета и консистенции выделений);
•       наследственный фактор (рак шейки матки у близких родственниц).

Цели и задачи гистологии в медицине

Существует общая гистология – наука о тканях организма, занимающаяся детальным изучением их свойств, строения, функций и взаимодействия. Отраслью этого учения является частная микроскопическая анатомия, которая исследует каждый орган и его состав по отдельности. Гистология также классифицируется на нормальный и патологический типы. Первый – анализ тканей здорового организма, второй – занимается изучением их физиологической и морфологической трансформации, которые связаны с различными заболеваниями. Главными задачами гистологической деятельности считаются:

• правильный диагноз в спорных ситуациях;
• детальный анализ темпа развития злокачественной опухоли;
• выявление онкологии на первых этапах формирования;
• исследование трансформаций, которые протекают в тканях больного при терапии;
• диагностика изучаемых патологий;
• определение роста и распространения раковых клеток.

Цитологические (PAP-тест)

Анализ, направленный на обнаружение клеток, появляющихся в организме в ответ на поражение папилломавирусом. Для его проведения берётся мазок с шейки матки и цервикального канала, который окрашивается в лабораторных условиях и исследуется на наличие клеток, появляющихся при заражении ВПЧ.

Мазок с шейки матки

Если вирус уже начал свою разрушительную деятельность, у женщины обнаруживается предрак – дисплазия, на которую указывают неправильно развитые (атипичные) клетки в мазке:

• Койлоциты, имеющие деформированное, иногда увеличенное ядро и дистрофические изменения в цитоплазме. Внутри них могут находиться частицы вируса, называемые «стрелами». При начавшемся распространении папилломавируса, эти вирусные частицы встраиваются в геном клетки и подчиняют ее.
• Дискератоциты. Клетки с признаками ороговения, которое может быть слабым или более сильным. Внутри них находится плотный белок кератин.
• Обладающие другими признаками атипии – неправильной формой, строением, увеличенным количеством ядер, неравномерностью окраски. Иногда встречаются «голые» ядра без оболочки.
• Атипичные парабазальные. При тяжёлой степени дисплазии в мазке обнаруживаются атипичные парабазальные клетки, находящиеся внизу – в глубине эпителия. Их появление указывает на глубокое проникновение вируса и тяжелую дисплазию.

При дальнейшем развитии болезни поражается самый нижний базальный слой, и у женщины возникает начальная стадия рака – карцинома in situ. После этого процесс выходит за пределы эпителия, что сопровождается появлением глубокой (инвазивной) раковой опухоли. В этом случае в мазке находят раковые злокачественные клетки, значительно отличающиеся от здоровых. По их строению врач может определить начавшееся злокачественное перерождение и тип опухоли.

Стадии рака

Цитологический анализ позволяет обнаружить предраковое и злокачественное перерождение тканей до появления симптомов болезни. Поэтому его часто применяют в качестве профилактического диагностического исследования. 

Основные периоды исторического развития гистологии.

Исторический процесс
развития гистологии делят на 4 периода.

Первый период это накопление
первоначальных фактов
домикроскопический(1595-1800) В 1595г Захарий
Янсон изобрел 1 микроскоп. В 1600 Галилео
Галилей приспособил под микроскоп
зрительную трубку. Складывались лишь
представления о тканях на основе
расчленения трупов, все классификации
строились на их внешнем сходстве и
различии. Иногда в 1 группу попадали
различные ткани.

Второй микроскопически(1800-1838)
В 17 веке Гук усовершенствовал микроскоп,
позволивший изучить тонкое строение
тканей. Усилились разработки технических
методов исследования. Пуркинье под
названием протоплазма описывает клетку,
Броун ядро, Бэр открыл женскую половую
клетку. Шван сформулировал клеточную
теорию.

Третий период с1839-1946. Под
влиянием клеточной теории развивается
гистология и на ее основе цитология,
гематология, эндокринология, иммунология,
эмбриология, патологическая анатомия.
В императорских университетах открываются
кафедры для изучения гистологии.

Четвертый период с началом
1945. В 1945 Портер и соавторы исследуя
фибробласты, открывают эндоплазматический
ретикулум. Новые значения о строении
клеток были дополнены информацией об
их функциях.

Гистология – определение свойств тканей

• биопсия (инцизионная, эксцизионная);
• соскоб шейки матки;
• пункция–прокол иглой под шейкой матки;
• мазок-отпечаток (забор образца ткани эндоцервикса – слизистой оболочки шейки матки).

Перед процедурой рекомендуют выполнить подготовку: сдать анализ крови на наличие венерических заболеваний, мазок на цитологию, исследовать чистоту влагалища, отказаться от половых контактов и на два дня приостановить местное лечение. Так лучше исключить спринцевания и химические средства для интимной гигиены.

Забора ткани для цитологического исследования занимает большее время и выполняется следующим образом:

1. Пациентка располагается на гинекологическом кресле, врач осматривает канал шейки матки с помощью кольпоскопа для выявления участка патологии;
2. С помощью различных методик (скальпельная биопсия, лазера, электроножа) получают материал пораженных тканей. Подготовленный препарат отправляют на исследования в лабораторию;
3. Поврежденный участок шейки обрабатывают кровоостанавливающим препаратом, при наличии кровотечения ушивают.

После процедуры фрагмент ткани помещают в формалин или этанол, врач делает тонкий срез и окрашивает его, применяя гематоксилин и эозин. В некоторых случаях гистологический препарат могут поместить в парафин. Под воздействием красителя состав тканей меняет цвет: белки становятся красными, а нуклеиновые кислоты приобретают синий оттенок.

Сколько дней делается такой анализ

Анализ на гистологию в каждой клинике может проводиться разное количество времени. В среднем анализ на гистологию занимает от 7 до 10 дней. Тут сроки будут зависеть от наличия лаборатории и требуемого оборудования в ней в каждой клинике.

Если в больнице есть своя лаборатория и требуемое оборудование, что сроки проведения такого тестирования могут быть значительно сокращены. В таком случае исследование может быть проведено за 2-3 дня. Есть также и экспресс-диагностика. Она может проводиться в операционной. Когда во время проведения операции у врача возникает подозрение о наличии в пациента опухоли, то он может в процессе проведения операции рассмотреть пораженный орган под микроскопом.

Если при этом результат будет положительным, то хирург обязан провести расширенную операцию, с учетом всех правил ее проведения при наличии онкологических патологий.

Тут также стоит отметить, что расшифровка такого заключения под силу не каждому, так как обычно врачи ее пишут на латыни.

Когда обследование будет проводиться в государственной клинике, то результаты тестирования пациент может получить у врача, который его проводил. Также у него можно получить и расшифровку сведений.

Когда же тестирование будет проводиться в частной клинике, то пациент на руки получает документ, в котором будут указаны все его данные, время и способ исследования, какие препараты и образцы тканей при тестировании были использованы.

Основное заключение будет находиться в самом конце бланка. Когда пациент увидит большой объем информации в нем, то не стоит пугаться, это вовсе не говорит о том, что в организме найдено много патологий.

Также стоит отметить, что независимо от результатов тестирования доктор не указывает в заключении своих рекомендаций.

Иммуногистохимические особенности, характерные для инвазивной крибриормной ​​карциномы груди

Резекционные образцы фиксируют в 10% нейтральном формалине с последующей обычной дегидратацией и встраиванием парафина. Толщина каждого образца составляет 4 мкм. Выполняется окрашивание гематоксилином и эозином (H&E), затем проводится иммуногистохимия. Используемые антитела включают ER, PR, HER-2, Ki-67, Кальпонин, p63, CK5/6, CD10, E-кадгерин, p120, p53, CD56, CgA, Syn.

Инвазивная крибриформная карцинома молочной железы имеет тенденцию быть положительной по рецепторам эстрогена почти в 100% случаев, а рецепторам прогестерона почти в 70%. Заметной разницы в статусе рецепторов гормонов при чистом и смешанном типах решетчатой ​​карциномы молочной железы не установлено. Рецептор эстрогена (ER) и рецептор прогестерона (PR) являются важными маркерами для направления терапии и определения прогноза.

Амплификация рецептора 2 эпидермального фактора роста человека (HER-2) выявляется крайне редко. Статус Her2neu можно определить с помощью иммуногистохимии или методики FISH. 

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы

Учитывая положительные характеристики рецепторов PR, ER и отрицательные HER-2, крибриформные опухоли молочной железы относятся к люминальным.

На иммуногистохимических пятнах обычно отсутствуют миоэпителиальные клетки. Окрашивание также показывает, что решетчатые пространства не содержат материала базальной мембраны. Это говорит о том, что решетчатые опухолевые клетки имеют тенденцию не дифференцироваться в базалоидные клетки или лактирующий эпителий молочных желез.

Иммуногистохимическая диагностика инвазивного решетчатого рака молочной железы иногда основана на отрицательном иммуноцитохимическом окрашивании на ламинин, а также на ультраструктурных доказательствах дифференцировки просвета клетками, выстилающими кистозные пространства. По сути, это средство различения инвазивной крибриформной ​​карциномы груди и аденоидно-кистозной карциномы груди. Отрицательное окрашивание ламинином предполагает отсутствие базальной пластинки вокруг островков опухолевых клеток и внутри кистоподобных пространств опухоли, что будет контрастировать с сильным положительным окрашиванием, наблюдаемым при аденоидно-кистозном раке молочной железы.

Если иммуногистохимическое окрашивание выявляет присутствие миоэпителиальных клеток, это может указывать на природу опухоли «in situ», а их отсутствие предполагает инвазивный контекст. Белковые красители, такие как кальпонин, p63 и тяжелая цепь гладкомышечного миозина, являются полезными маркерами для определения присутствия миоэпителиальных клеток в крибриформных карциномах молочной железы.

При анализе инвазивной крибриформной карциномы для миоэпителиальных клеток используются различные маркеры:

E-кадгерин, по-видимому, является чувствительным маркером протоковой дифференцировки по сравнению с дольковой дифференцировкой, но его полезность при пограничных поражениях в настоящее время неизвестна.

Часто индекс маркировки Ki67 для инвазивных решетчатых карцином груди очень низкий. Этого можно ожидать при раке молочной железы «низкой степени», таком как чисто инвазивная решетчатая карцинома молочной железы. По результатам одного из исследований, индекс пролиферации Ki-67 находился в диапазоне от 2% до 20%, среди которых 58% (7/12) случаев имели ki67≤14%, а 42% (5/12) случаев имели Ki67>14%.

Ki-67 представляет собой ядерный антиген, который связан с потенциалом роста многих раковых опухолей и является маркером пролиферации, экспрессируемым только в циклических клетках. Как следствие, количественная оценка окрашивания Ki-67 на залитых парафином срезах опухоли молочной железы может дать довольно точную оценку индекса пролиферации отдельной опухоли рака молочной железы.

Чтобы исключить нейроэндокринную дифференцировку, проводят тестирование на наличие нейроэндокринных маркеров, таких как CD56, CgA и Syn, все результаты являются отрицательными.

Процедура диагностики

Зачастую при всех случаях онкологии проводят одни и те же исследования. Мы постараемся объяснить насколько важна гистология.

1. Возможный пациент приходит с жалобами к врачу или это может быть плановый осмотр.
2. Доктор проводит пальпацию, осмотр и опрашивает пациента.
3. Если есть подозрения на рак, то его направляют сдавать анализы — общий и биохимический анализ крови и кал.
4. При наличии отклонений в анализах пациента направляют к врачу-онкологу.
5. Делается рентгенография, УЗИ брюшной полости.
6. Если у пациента присутствует чёткая симптоматика, то начинается диагностика определенного органа.
7. В случае присутствия ярко выраженной опухоли, делают забор.
8. И уже тут проводят биопсию и отправляют кусок ткани на гистологию.
9. После могут провести КТ или МРТ. Это необходимо для выяснения степени инвазии — насколько раковая опухоль поражает здоровые ближайшие клетки и ткани.

Только после проведения тщательной диагностики, врач строит окончательный диагноз и придумывает стратегию для борьбы с недугом.

Цель назначения гистологического исследования

Гистологическое исследование новообразований назначается с целью анализа динамики роста злокачественного образования, изменения в тканях, которые произошли после терапии (проверяется эффективность лечения), установки показаний для проведения радикального хирургического вмешательства, дифференцирования злокачественных и доброкачественных новообразований, наличия опухоли на ранних этапах ее развития, постановки максимально точного диагноза.

Если результаты исследования продемонстрируют наличие патологического процесса, доктор подбирает эффективный комплекс лечения в соответствии с диагнозом

Важно помнить, своевременная диагностика – это залог успешного и кратковременного лечения, возможна без хирургического вмешательства

Для исследования используют два метода: изучение тканей, которые были получены в процессе хирургического вмешательства и биопсия (целенаправленное иссечение небольшого кусочка ткани для исследования).

Важно понимать, что любая бородавка может быть раком, а родинка злокачественной опухолью, и только гистологическая диагностика позволит определить тип новообразования

Как проводится гистологическое исследование: этапы процедуры

Процедура проходит в несколько этапов:

1. Подготовка к биопсии;
2. Забор биоптата;
3. Фиксация тканей и подготовка препарата для микроскопии;
4. Непосредственно гистологическое исследование;
5. Расшифровка результатов.

Подготовка к гистологии

Процедура подготовки зависит от места забора биоптата. В гинекологии, урологии, андрологии потребуется соблюдение определенных гигиенических правил; в пульмонологии – предварительный отказ от курения; при обследовании мышечных структур – ограничение физических нагрузок. В каждом конкретном случае все необходимые рекомендации можно получить на консультации с лечащим врачом. Процедуру проводят утром, натощак, после 8-часового воздержания от приема пищи. По мере необходимости, пациенту назначают седацию или местный наркоз.

Как берут материал на гистологию?

Основной метод извлечения материала для гистологического исследования – биопсия. Она может быть диагностической – с частичным забором образцов, и лечебной – с полным удалением образования. Необходимый биоптат можно извлечь из любого участка организма с использованием специально разработанных методов.

Виды биопсии:

• эксцизионная – при хирургическом удалении всего новообразования или органа;
• инцизионная – хирургическое иссечение части пораженного органа или патологической структуры;
• пункционная – забор микроскопической части образца с помощью прокола иглой;
• аспирационная – используют для получения образца содержимого из полых органов или патологических полостей путем вакуумного отсасывания;
• трепан-биопсия – используют для получения внутрикостных материалов (нужна специальная толстая игла);
• щипцевая – используют для забора слизистых и подслизистых тканей при обследовании полых органов (в процессе гастро- или колоноскопии);
• кюретажная – использование микрокюретки позволяет получить материал со внутренних стенок обследуемых органов (преимущественно матки, влагалища).

Анализ материала

При изучении образца оценивают макроскопические и микроскопические данные

Макроскопия биоптата обращает внимание на размер материала, цвет, плотность, консистенцию, а также наличие патологических изменений. Микроскопия подразумевает подробное изучение тонких срезов, для чего биоптат проходит специальную подготовительную обработку

Процедура включает несколько этапов:

1. Полученный биоптат фиксируют специальным раствором.
2. Ткань обезвоживают для получения более плотной структуры.
3. Заливают материал парафином или смолами (при электронной микроскопии).
4. С помощью микротома нарезают полученный блок на тонкие пластинки.
5. Помещают срезы на предметное стекло и делают окрашивание для получения контрастного изображения.
6. Готовые препараты изучают под микроскопом.

Интерпретация результатов гистологического исследования

Преобразование изображения многочисленных двухмерных срезов в трехмерную структуру тканей требует участия специалиста высокой квалификации с опытом работы. Занимается этим врач-патоморфолог или патологоанатом. По итогам расшифровки специалист выдает заключение с указанием заключительного или ориентировочного диагноза. В документе указаны следующие данные:

• информация о пациенте;
• тип исследуемой ткани и место ее забора;
• способ исследования – срочная или плановая, используемые методики и красящие составы;
• основное заключение с подробным указанием всех выявленных тканей и обнаруженных патологических процессов (указывается макро- и микроскопическое описание, а также результаты иммуногистохимического анализа).

Расшифровка зависит от того, какая ткань подвергалась изучению. Микроскопический анализ тонких срезов позволяет выявить атипичный рост клеток, нарушение их структуры, в том числе на уровне ядра и других клеточных органелл. 

Важно! Результат гистологического исследования отличается высокой точностью, так как патологию исследуют в непосредственной близости – под микроскопом, а не через толщу других тканей и органов. Врач получает доступ к клеточным структурам, которые недоступны самому чувствительному рентгеновскому или УЗИ-аппарату

Что может показать анализ?

Анализ на гистологию назначается не во всех случаях. Гистология новообразований необходима для того чтобы определить воспалительный процесс в органах ЖКТ, для диагностирования патологических изменений женских половых органов, для определения причин бесплодия, для диагностирования раковых образований.

Анализ в редких случаях показывает ложные результаты, по статистике на 98 % гистология демонстрирует истинные результаты, что позволяет установить диагноз и определиться с дальнейшими действиями.

Больше свежей и актуальной информации о здоровье на нашем канале в Telegram. Подписывайтесь: https://t.me/foodandhealthru

Будем признательны, если воспользуетесь кнопочками:

В каких случаях необходима гистология?

На эндоскопию с биопсией направляют: врач-терапевт, гастроэнтеролог, проктолог, онколог.

• необъяснимые расстройства стула – диарея или запоры;
• патологические примеси в кале: непереваренные частицы пищи, кровь, гной, слизь;
• отсутствие аппетита, отвращение к пище;
• тошнота, рвота;
• прогрессирующее снижение веса;
• болезненные непродуктивные позывы к дефекации;
• недержание кала;
• выявление объёмного образования кишечника с помощью ирригоскопии, компьютерной томографии.

Гистологическое исследование

Гистологическое исследование, по сути, является методом диагностики заболевания на тканевом уровне — исследование врачом-патологоанатомом под микроскопом специально подготовленного участка патологической ткани позволяет получить представление о сути и выраженности патологического процесса, выявить его особенности и благодаря этому точно поставить диагноз и подобрать требуемое лечение. В онкологии гистологическое исследование играет роль «третейского судьи» — только заключение патологоанатома о наличии патологических клеток даёт право клиницисту поставить диагноз «рак». Гистологическое исследование широко применяется практически во всех медицинских специальностях и всегда выполняется после любой операции, но именно в онкологии оно имеет особое значение.