Что такое иммуногистохимическое исследование и когда его проводят

Содержание:

Этапы диагностики

Диагностика ИГХ подразумевает выполнение биопсии матки (выскабливание слизистых детородного органа), поэтому проводят ее в тот период, когда эндометрий готов к таким манипуляциям. Врач назначает определенную дату для сдачи анализов

Крайне важно, чтобы процедура была выполнена именно в этот день

Как правило, ИГХ назначают на 5–7-й день цикла при необходимости выявления воспалений, миомы, полипов и патологического разрастания эндометрия. При оценке рецепторной функции проведение исследования рекомендуется на 20–24-е сутки.

В процессе подготовки к процедуре нужно придерживаться следующих рекомендаций:

  • в течение семи дней до исследования не принимать гормональные медикаментозные средства;
  • во избежание кровотечения не прибегать к использованию препаратов, способствующих разжижжению крови;
  • в день проведения иммуногистохимического исследования эндометрия строго соблюдать все правила интимной гигиены.

Диагностика проводится в несколько этапов:

  1. Прежде всего вводят обезболивающее.
  2. Производят установку специальных расширителей.
  3. Обрабатывают ткани антисептическим средством.
  4. Вводят специальный прибор – гистероскоп.
  5. Выполняют выскабливание слизистых.
  6. Извлекают аппарат.
  7. Поврежденные сосуды сразу прижигают.
  8. Полностью извлекают оборудование.
  9. Повторно сканируют все исследуемые органы.
  10. Убирают расширители.

Когда все диагностические мероприятия выполнены, женщину отправляют в палату, где ей нужно оставаться до тех пор, пока действие анестезии не закончится. Сразу после этого можно будет покинуть медицинское учреждение. Результаты будут готовы спустя несколько суток.

Когда назначается исследование?

Реакцию можно получить несколькими способами. Часто применяется прямой, при котором используется один вид маркированных антител. Последние должны связаться с выявляемым веществом или молекулой-мишенью. Если последняя присутствует в биоптате, то исследуемая ткань окрашивается. Непрямой метод считается более информативным и чувствительным. Его суть заключается в поэтапном введении 2 разных антител. Немаркированные первичные антитела вступают в реакцию с опухолевым антигеном в биоптате, образуют комплекс антитело-антиген. Затем вводят вторичные уже маркированные антитела (реагент), которые связываются с определенной частью молекулы первичного антитела. Т. е. первичные антитела являются антигенами для вторичных.

ИГХ назначается в том случае, когда обычного гистологического исследования недостаточно. Например, когда опухоль молочной железы имеет неспецифичное микроскопическое строение, не позволяющее поставить точный окончательный диагноз.

Перед процедурой пациентке нужно прекратить прием гормональных лекарств – за 7 дней до ИГХ. Также нужно отказаться от приема средств, влияющих на вязкость крови. Перед посещением диагноста нужно принять душ. У каждой пациентки день проведения диагностики назначает врач, оценивая ее менструальный цикл в индивидуальном порядке.

Иммуногистохимия проводится в несколько этапов. Это малоинвазивная методика, в ходе которой берется материал для биологического исследования:

  1. Иссекают образец ткани из груди, сначала нанеся отметку черным маркером.
  2. Отвозят ткани в лабораторию, поместив в емкость с формалином.
  3. В лаборатории состав заливают раствором, который его обезжиривает, заливают парафином и отправляют на гистологию.
  4. Помещают на стекло срезы 1 мм толщиной и окрашивают белковой сывороткой для выявления антигенов.
  5. Расшифровывают результат и записывают его.

Гистологические особенности

Миофибробластома, как правило, представляет собой невзрачную веретено-клеточную опухоль, однако появляется все больше доказательств того, что она охватывает более широкий морфологический спектр, чем описанный первоначально. Это в основном связано с тем, что неопластические клетки, демонстрирующие вариабельную фибромиофибробластическую дифференцировку, могут иметь заметную внутриочаговую и межочаговую изменчивость в морфологии. 

За последние два десятилетия были обнаружены несколько гистологических вариантов (клеточные, инфильтративные, эпителиоидные, децидуальные, коллагенизированные/фиброзные, липоматозные, миксоидные варианты), включая некоторые необычные особенности. Их распознавание имеет решающее значение, чтобы избежать путаницы с другими доброкачественными или злокачественными опухолями груди. 

Миофибробластома гистология – воспалительный тип

Несмотря на то, что миофибробластома груди демонстрирует широкие морфологические вариации клеточного состава, паттернов роста и внеклеточного матрикса, есть общие диагностические признаки.

Морфологические особенности, полезные для диагностики миофибробластомы:

  • Неинкапсулированную опухоль с раздвигающейся, дольчатой ​​структурой роста;
  • Обычно состоит из мягких, тонких, веретенообразных клеток, плотно упакованных в короткие, прямые, беспорядочно пересекающиеся пучки или скопления связанных клеток, прерванных толстыми, пучками гиалинизированного коллагена;
  • В меньшинстве случаев могут быть инвазивные края;
  • Клетки различаются по внешнему виду: от фибробластоподобных клеток со скудной цитоплазмой и удлиненными ядрами до клеток с явными миоидными чертами, состоящими из обильной бледной или глубоко эозинофильной цитоплазмы. Последние имеют четкие границы и содержат ядра округлой или овальной формы с 1 или 2 небольшими ядрышками. Иногда ядра могут иметь бороздки или псевдовключения;
  • В некоторых областях неопластические клетки могут демонстрировать палисадные ядра, близко имитирующие доброкачественную опухоль оболочки периферических нервов;
  • Атипичные митозы отсутствуют;
  • Митотическая активность низкая, митозов насчитывается до 2 на 10 мощных полей;
  • Некроз отсутствует;
  • Сосудистый компонент опухоли в разной степени представлен сосудами малого и среднего размера, часто с гиалинизацией и пенистыми гистиоцитами в их стенках;
  • Как правило, в строме опухоли можно обнаружить множество тучных клеток;
  • Лимфоплазмоцитарный инфильтрат отсутствует или обнаруживается только очагово.

Когда требуется ИГХ, показания

Для того чтобы ответить на вопрос о показаниях, и выяснить, для чего нужно ИГХ исследование, сначала необходимо уяснить, что же это такое.

Все наверняка помнят со школьных лет опыт, когда капля настойки йода с абсолютной точностью выявляла в образце крахмал.

Йод вступал с крахмалом в реакцию, результатом которой было образование пятна характерного темно-фиолетового цвета.

Тот же принцип положен и в основу ИГХ, с той только разницей, что реакция вещество-антитело не имеет видимых цветовых эффектов.

Воздействие производится реактивами, содержащими антитела к искомому веществу. Антитело вступает в реакцию с объектом исследования, обозначая его присутствие.

Но ученные нашли выход: антитела подкрашиваются искусственно. Вступившие в реакцию вещества образуют с искомым элементов связи, наглядно обозначая присутствие последнего.

Гистохимический метод исследования позволяет с высокой точностью выявлять вещества, сопровождающие образование злокачественных изменений в организме – раковых клеток и метастазов.

Благодаря этому тесту можно определиться с дальнейшим прогнозом. Таким образом, основное показание к ИГХ исследованию – подозрение у пациента онкологических заболеваний, конкретно, РМЖ.

Возможности гистологического исследования ИГХ:

  • определение типа (злокачественное/доброкачественное) образований;
  • прогноз возможного развития опухолевого заболевания;
  • выявление метастазирования карциномы;
  • определение эффективности различных способов лечения;

Кроме того, ИГХ метод имеет широкое распространение в других областях медицины, в частности, в гинекологии, где большое распространение получило иммуногистохимическое исследование эндометрия.

МЕЛАНОМА. ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ

I. Для диагностики первичной меланомы может быть использован тест FISH, но только в том случае, когда ни гистология, ни иммуногистохимия не дают результата (в очень редких случаях, клетки меланомы не реагируют на «покраски» ИГХ). Но если этим тестом заменяют иммуногистохимию, как тут: FISH и меланома , то вы должны четко понимать, что с вас либо просто «сосут деньги», либо кто-то пишет очередную диссертацию.

II. И «до кучи». Тест FOUNDATIONONE при меланоме и еще какие-нибудь подобные.Если врач предлагает вам пройти такое исследование, то он должен вам четко объяснить, чего вы получите «на выходе» (ну, кроме определения BRAF мутации). Какие лекарства, помимо уже известных и зарегистрированных, вам могут предложить по результатам этого теста ? В какие КОНКРЕТНО КИ вас включит врач, если в результате теста будет обнаружено «нечто неизведанное»?Вот статья, в самом начале которой четко написано, для чего предназначен этот тест. Перевод гуглом очень качественный. Я еще могу понять, когда его проводят в США, где доступность клинических исследований очень высока, но зачем его делать у нас, остается загадкой.

Добавочка, январь 2020г

Беларуссия, наши дни. Уж не знаю как там выполняется биопсия сторожевых лимфоузлов, но ситуация с ИГХ совершенно аналогична.

РОНЦ Блохина, Москва.

Что выявляет

Главная цель проведения ИГХ – выявление причин бесплодия, но в ходе исследования нередко обнаруживают различные изменения в эндометрии. По этой причине анализ назначается в случае подозрения на хронический эндометрит, не сопровождающийся характерной симптоматикой.

При получении результатов удается выявить такие нарушения, как:

  • неполная трансформация маточного слоя;
  • развитие эндометрита;
  • нарушение фаз развития эндометрия;
  • гиперплазия.

Процедура подразумевает выскабливание полости матки. После этого полученный биоматериал тщательнейшим образом исследуется. Кроме того, удается высчитать промежуток времени, когда отмечается точное соответствие маточного слоя и эмбриона. В норме этот период наступает с 20–24-х суток цикла.

Диагностика лимфомы

Онкологические заболевания — беда человечества. Хотя современная фармакология и технические разработки позволяют излечиваться от этих болезней. Но здесь очень важна диагностика, особенно на ранних стадиях заболевания. Онкология лимфы — достаточно распространенная беда. ИГХ-исследование при лимфоме — один из способов поставить точный диагноз, чтобы затем назначить адекватную терапию. Данное исследование проводится на биоптате лимфатической жидкости или ткани системы кроветворения. Взятый для исследования материал подвергается окрашиванию специальным веществами, помогающими определять онкомаркеры. К сожалению, этот вид исследования несовершенен и в большинстве случаев дополняется другими методами диагностики. К тому же часто не сама лимфатическая система становится причиной проблемы. Именно это и позволяет выявить ИГХ-исследование лимфы.

Негативное влияние ИГХ на организм человека

Иммунногистохимическая методика диагностики грудных желез не провоцирует никаких отрицательных последствий для здоровья пациентки. Неприятными моментами является:

  1. Возникновение боли на этапе проведения биопсии, однако практически всегда область груди для проведения манипуляции обезболивается анестезирующим средством.
  2. Занесение инфекции при игнорировании правил антисептики, что может привести к воспалительному процессу.
  3. Проявление мигрени, как реакция на анестетик. В данной ситуации головная боль носит временный характер и купируется обезболивающими средствами

Патоморфоз опухоли

Патоморфоз опухоли проявляется степенью замещения опухолевых клеток на рубцовую ткань.

Степени патоморфоза

Выделяют 5 степеней лечебного патоморфоза по Miller–Payne (применяется преимущественно в России и Великобритании).

В других странах применяются другие классификации и шкалы оценки. Так в США более распространена интегральная оценка Residual Cancer Burden (RCB), которая рассчитывается на сайте M.D.Andersen Center, позволяющий прогнозировать безрецидивную выживаемость с низкой (RCB1), промежуточной (RCB2) и высокой (RCB3) вероятностью. 

Полный патоморфоз

5 степень лечебного патоморфоза (по Miller–Payne) предполагает полное замещение опухолевых клеток рубцовой тканью. Опухолевых клеток не обнаруживается вообще. Это демонстрирует максимальный эффект от неоадьювантной химиотерапии.

Чаще всего такой ответ бывает при агрессивных опухолях: Her2-позитивной и триждынегативной. Полный патоморфоз абсолютно не гарантирует 100% шансы на выздоровление.

Наличие полного патоморфоза говорит о правильности подобранного лечения со стороны химиотерапевта и о том, что опухоль оказалась чувствительна к такому лечению.

Проведение исследования

Проводится трепанобиопсия путем забора кусочка ткани из места предполагаемой опухоли. На груди у женщины маркером отмечается черная точка. Если была проведена операция, то иссеченный материал также подходит для изучения. Затем ткань проходит следующие этапы:

  • отправляется в лабораторию;
  • помещается в емкость с формалином;
  • обезжиривается;
  • заливается жидким парафином для получения блоков с целью изучения на гистологию;
  • с блоков делаются срезы толщиной в 1 мм, помещаются на специальные стекла;
  • срезы окрашивают препаратами или антителами для иммуногистохимии;
  • через 10-12 дней лаборанты интерпретируют результаты.

Исход благоприятен после терапии гормональными препаратами, если Ki-67 в анализе, как показатель на онкогенность, не превышает 15-17%. Если доходит до 35% в составе ткани, то опухоль имеет стремительное развитие. В данном случае приостановить ее можно только химиопрепаратами. При превышении показателя Ki-67 в 85-95% летальный исход вероятен практически в каждом случае.

Статус рака – HER2

Именно рецепторы HER2, лежащие на поверхности клеток, являются некими “антеннами” для улавливания химических сигналов или команд, отдаваемых организмом клеткам. Рецепторы должны быть в норме, а клетки молочной железы – своевременно делиться и восстанавливаться.

У многих женщин так называемый ген HER2 начинает давать сбой, вырабатывая множество рецепторов. Клетка, получая опасный сигнал, начинает быстрее делиться и размножается уже бесконтрольно. Когда врачи утверждают, что иммуногистохимическое исследование указывает на статус HER2, это значит следующее: диагностирован рак молочной железы, его начальная стадия.

У каждой женщины при подозрении на рак определяется статус опухоли. Для чего это нужно? Конечно же, для назначения правильной терапии. Статус постепенно может трансформироваться из положительного в отрицательный. Иммуногистохимия выявляет степень онкогенных клеток в забранной патологической ткани. При раке же и карциноме молочной железы рецептор или белок превышает свое процентное содержание. Клетки становятся неуправляемыми и начинают неконтролируемо делиться, расти.

Расшифровка анализа

Исследуется структура взятой ткани, количество атипичных антител, по которым и будет определен вид рака.

Интерпретация или расшифровка анализа проводится онкологом, который и должен донести до пациента всю полученную информацию. В результате (на бланке анализа) обязательно прописываются показатели Ki 67, указывающие на степень озлокачествления опухоли. Кроме того, обследуется гормональный фон женщины, от которого напрямую зависит поведение новообразования, степень его прогрессирования и скорость появления метастазов.

Иммуногистохимическое обследование диагностирует стадию, форму и степень развития онкологии, после чего и будет подобрано самое оптимальное лечение. Если гормональный фон в норме, но опухоль неактивна, лечение может ограничиться назначением пациенткам гормональных препаратов. При излишней активности опухоли, то есть при повышении показателей Ki 67, уже не обойтись без назначения более тяжелых химических средств.

Клетки в здоровом организме должны самостоятельно восстанавливаться и нормально делиться. Значит, при позитивном HER2 рак будет прогрессировать, а опухоль станет быстро увеличиваться в размерах. Для подавления стимуляции роста новообразования при положительном HER2 лечение назначается медикаментозное (Герцептин, Лапатаниб). Если HER2 отрицательный или негативный, то лечение иное – с назначением более действенных химиопрепаратов.

ИГХ считается сложным и многоступенчатым методом. Используется много маркеров, и расшифровать результаты иммуногистологических анализов правильно под силу лишь специалистам. Обычно при выявлении онкологии у женщин собирается целый консилиум врачей, чтобы более адекватно распланировать и выбрать всю последующую тактику лечения.

ИГХ важен для врачей с целью выбора правильной тактики при назначении лечения, для дачи прогнозов на будущее

ИГХ эндометрия

ИГХ применяется не только в онкологии. Распространенным анализом, применяемым в гинекологии, является иммуногистохимия эндометрия.

Показанием к ИГХ эндометрия являются такие проблемы:

  • невынашивание беременности;
  • аутоиммунные реакции (отторжение плода);
  • неудачные попытки зачатия;
  • ряд неудачных процедур ЭКО;
  • хронический эндометрит.

Данный вид исследования имеет свои особенности. Так, например, день цикла, в который производится забор биоптата, зависит от целей исследования.

В ходе иммуногистхимического исследования эндометрия выявляется чувствительность к различным гормонам, что позволяет выбрать верный метод лечения либо выяснить, что проблемы носят механический характер (например, спайки труб) и определить прогноз.

Есть ли противопоказания к ИГХ? Иммуногистохимическое исследование проводится с изъятым образцом ткани вне организма.

Суть методики

При раке наблюдается продуцирование опухолевидными клетками специальных белков, доказана связь между ними и антителами. Метод позволяет исследовать ткань путем использования стандартных антител, которые при взаимодействии с раковыми клетками начинают излучать свечение разной волновой длины. Новообразование же диагностируется в случае выявления подобного свечения с разной длиной волны в исследуемом биоптате.

Опухолевидные клетки в организме являются чужеродными. Организм в борьбе с ними начинает вырабатывать антитела. ИГХ-исследование, как бы в помощь “человеческим” антителам, легко обнаруживает раковые элементы, если таковые имеются. Причем оно способно определить их доскональную структуру, строение.

При раке наблюдается продуцирование опухолевидными клетками специальных белков, доказана связь между ними и антителами

ИГХ важен для врачей с целью выбора правильной тактики при назначении лечения, для дачи прогнозов на будущее. Для больных онкологией этот метод позволяет выявить:

  • рецепторы стероидных гормонов;
  • возможное развитие лимфомы (ходжкинской, неходжкинской);
  • гистогенез опухоли в случае неопределения первичных очагов новообразования;
  • развитие неклассифицируемой опухоли;
  • процентное соотношение HER2 в клетках молочных желез.

Полученные результаты интерпретируются специалистом-онкологом

Как правило, при исследовании наиболее важно определить количество рецепторов эстрогена и прогестерона в молочных железах. При множестве таких элементов опухоль обычно ведет себя неагрессивно и растет медленно

Для пациентов же это шанс излечиться при выявлении онкологии на раннем этапе. Своевременная гормонотерапия даст положительный исход в 70-80% случаев.

Анализ может быть назначен при подозрении на рак молочных желез и при неприятных симптомах. Обычно иммуногистохимия проводится с целью выявления первичной опухоли, т. е. одиночного новообразования. Но и метастазы ИГХ обязательно выявит, если таковые фактически есть.

Иммуногистохимическое исследование как процедура не имеет особых противопоказаний, поэтому может быть назначено любой женщине при подозрении на рак. Выявление опухоли на начальном этапе дает больше шансов излечиться. Хотя забор ткани – дело не из приятных, но пациенткам рекомендуется потерпеть, чтобы наслаждаться жизнью без онкологии и в полной мере в дальнейшем.

Кроме определения опухоли в молочных железах, рекомендуется проходить иммуногистохимическое исследование женщинам при патологии в репродуктивных органах, подозрении на бесплодие или заболеваниях в полости матки.

Эндометрий также подлежит забору, если были неудачные попытки ЭКО или беременность заканчивалась выкидышами, невынашиванием малыша. Возможно, какие-либо клетки в эндометрии препятствуют зачатию. ИГХ выявит степень реагирования тканевых рецепторов в матке на гормоны. Подобная стимуляция клеток укажет на неполадки и видоизменение эндометрия, поможет врачам определить правильные методы лечебного воздействия.

Игх при раке молочной железы: исследование игх при онкологии молочной железы, типы рака молочной железы по игх

ИГХ при раке молочной железы — необходимость современной онкологии. Его результаты позволяют подобрать максимально подходящее женщине противоопухолевое лечение.

Что такое иммуногистохимия при РМЖ?

Иммуногистохимический анализ или коротко ИГХ основан на способности иммунитета синтезировать вещества, нейтрализующие инородные агенты — бактерии, вирусы, грибы и выделяемые ими токсины. Инородные агенты — это антигены, в их присутствии иммунные клетки вырабатывают определённое антитело, на каждое антитело имеется свой антиген.

Рак молочной железы умело скрывается от санкций иммунитета, тем не менее раковые клетки и их структурные элементы — антитела, иммунитет их не видит, но ИГХ выявляет эти антитела.

При ИГХ кусочек опухоли обрабатывают реагентами с антигенами, которые находят своё антитело и соединяются с ним, изменяя окраску исследуемого кусочка злокачественной ткани.

Для чего проводят иммуногистохимию при РМЖ?

Иммуногистохимия нужна не для научной работы, а для практического использования:

  1. Обнаружение в клетках рецептора половых гормонов, чувствительного к эстрогену (ЭР) или прогестерону (ПР), прогнозирует чуть более плавное течение рака с меньшей вероятностью метастазирования, с преимущественной локализацией метастазов в костях, большую продолжительность жизни даже при генерализации процесса;
  2. Разная концентрация ЭР и ПР позволяет выбрать для конкретной женщины оптимальное лечение, так при высоком уровне ЭР в сочетании с ПР и даже без них можно рассчитывать на хороший результат гормональной терапии, без рецепторов обязательна химиотерапия;
  3. Наличие в клетке НЕR2 в высокой концентрации указывает на агрессивность рака, что требует химиотерапии и специфического нейтрализатора НЕR2;
  4. Сочетание позитивного гормонального статуса с НЕR2 вызывает сомнения в результативности гормонотерапии, поэтому в программу лечения включается химиотерапия;
  5. Высокая концентрация Ki-67 — свидетельство высокой степени злокачественности и, опять-таки, не позволяет избежать химиотерапии.

Показания к иммуногистохимии при РМЖ

При раке молочной железы для ИГХ только одно показания — определение степени агрессивности рака по его структурным компонентам для подбора оптимальной программы лечения.

Обычный морфологический анализ — гистология показывает степень злокачественности опухоли и её клеточный состав, часто неоднородный, но не позволяет определить белковые структуры:

  • Чувствительность каждой клетки к лекарствам определяется наличием у нее рецепторов половых гормонов;
  • Активность клеточного размножение и скорость роста ракового узла контролирует белок НЕR2, если его слишком много, то рак будет расти быстрее и формировать защиту клетки от лекарств вплоть до полной устойчивости;
  • Способность быстро воспроизводить замену погибшим клеткам, захватывая при этом новые территории, определяет маркер пролиферации Ki-67.

Концентрацию всех этих клеточный субстанций и определяет ИГХ.

Подготовка к исследованию

ИГХ при раке молочной железы проводится вне организма больной, но с кусочком её опухоли. Сегодня всем женщинам с впервые обнаруженным новообразованием в железе на этапе диагностики специальной иглой выполняется биопсия — кор-биопсия.

Взятый небольшой столбик раковой ткани подвергается гистологическому исследованию и ИГХ, что позволяет верифицировать, то есть доказать наличие рака, и планировать первичное лечение. Удалённую во время операции на молочной железе опухоль тоже подвергают гистологическому и ИГХ исследованиям для уточнения плана лечения.

Женщине перед биопсией надо только успокоиться, никакой определенной подготовки от неё не требуется.

О чем говорят результаты?

Обнаружение в раке молочной железы рецепторов ЭР и ПР предсказывает относительно доброкачественное течение при эффективности гормональных препаратов, но в реальной жизни опухоль может не среагировать на эндокринную терапию, правда процент устойчивости невысок.

Обнаружение Ki-67 прогнозирует неспокойную жизнь и интенсивное лечение с использованием максимальных возможностей химиотерапии для изменения негативного прогноза болезни.

Рецептор НЕR2 — прогностический фактор, предлагающий сосредоточение на химиотерапии без особых надежд на антигормональное воздействие, но с другой стороны, предсказывает необходимость использование таргетного препарата, связывающего патологический белок.

Как делается анализ?

Чтобы провести исследование, необходимы образцы самой опухоли и близлежащих тканей. Их можно получить при биопсии или после хирургического вмешательства. Материалу необходимо пройти несколько этапов подготовки перед исследованием: фиксация, промывание, обезвоживание, погружение в парафин или заливка другим веществом.

Исследуемый биологический объект должен получиться плотным, но не хрупким. Сначала материал промывают, обезвоживают и уплотняют в спиртах возрастающей крепости. Затем его просветляют путем погружения в смесь абсолютного спирта и О-ксилола в пропорции 1:1. После этого помещают в несколько порций чистого О-ксилола. И только потом биологический объект пропитывают в парафине. Последний этап помогает законсервировать ткань и на долгое время сохранить ее структурные особенности в парафиновом блоке.

Затем лаборант производит с этих блоков срезы, при помощи специального прибора — микротома, толщиной до 1 мкм. Полученные срезы наклеивают на предметное стекло, которое смазано глицерином и смесью белка. Подсушивают.

Чтобы исследуемый материал вступил в реакцию с антителом, необходимо его обезжирить и удалить парафин. Процедура называется депарафинизация. Для ее проведения используют 3 порции О-ксилола, а также спирты нисходящей крепости.

Последний этап — окрашивание. Оно проводится для того, чтобы четко видеть структуру тканей под микроскопом. Лаборанты могут использовать огромное количество красителей. Условно их можно классифицировать по:

  • происхождению, например, животные — кармин, растительные — гематоксилин, синтетические — эозин;
  • химическим свойствам, например, нейтральные, основные, кислые.

Чаще всего для этой процедур используют эозин, гематоксилин. Биологический материал помещают в раствор гематоксилина на несколько минут, затем промывают и дифференцируют результаты окрашивания. После этого провидится окрашивание в эозине, промывание и обезвоживание в спиртах восходящей крепости. Последовательная многоэтапная окраска позволяет на каждом этапе все больше определить нозологию и фенотип опухолевого образования. Патоморфолог изучает материл под микроскопом после каждого окрашивания. И только после оценки изменений и интерпретации полученной информации, назначает панель антител.

Чтобы получить точные данные о патологическом процессе и верифицировать заболевание  лаборант приступает к обработке подготовленного образца специальными реактивами, содержащими меченые антитела. В результате происходит реакция между антителом и антигеном. Это сопровождается характерной визуализацией, которая зависит от веществ, используемых для маркировки.

Особенности и значение диагностического метода

Иммуногистохимия – высокоточное микроскопическое тестирование взятого биоматериала, помогающее специалистам обнаружить и провести идентификацию особых веществ, характерных для раковых клеток.

На сегодняшний день гистохимия используется с целью:

  1. Уточнения предполагаемого диагноза.
  2. Установления вида или подвида опухоли.
  3. Определения стадии злокачественного процесса.
  4. Выявления степени распространенности единичного ракового новообразования.
  5. Установления патологического очага, провоцирующего метастазы, если исследуемый образец получен из вторичного злокачественного источника.
  6. Определения особенности ответной реакции на лечение.
  7. Подтверждения результатов предыдущих анализов.
  8. Исключения вероятного присутствия других злокачественных процессов.
  9. Уточнения скорости роста опухоли.

Основная суть иммуногистохимической диагностики состоит в следующем:

  • Изучение клеток биоптата злокачественного новообразования с применением реактивов, содержащих особые белки (или антитела), помеченные специальными веществами, поддающимися детектированию.
  • Иммуноглобулины обладают пространственным строением, которое разрешает им соединяться с отыскиваемым веществом (антигеном) в онкологических клетках. Подобный химический процесс называется «антиген-антитело», позволяющий подтвердить присутствие в исследуемом материале веществ, характерных для рака.

Способы проведения

Гистохимическая методика исследования полученного образца тканей груди может проводиться двумя способами:

Способ Особенности
Прямой Строится на специфической реакции, проявляемой в момент соединения маркированных тел непосредственно с обнаруженным антигеном.
Непрямой Является более популярным, чем прямой вариант. Отличается высокой чувствительностью, при этом его основной особенностью является то, что немаркированные первичные антитела сначала соединяются с выявляемым веществом, и лишь потом осуществляется установление их присутствие вторичными мечеными антителами. К тому же начальные вещества выступают антигенами для вторичных антител.

Стоит подчеркнуть, назначаемые медикаментозные средства для лечения онкологии должны получить подтверждение ИХГ.

Стоимость процедуры

Сколько стоит выполнение ИХГ молочной железы? В большинстве регионов РФ при наличии направления специалиста данный тест можно сделать бесплатно. Однако в случае обращения пациентки в коммерческие лаборатории, представляющие платные услуги, цена анализа зависит от применяемого количества антител.

В основном при проведении исследования используется от двух до пяти антител, но могут выявляться около десятка антигенов. Исходя из этого, и определяется стоимость процедуры:

  • От 2 до 5 антител – 4000-5000 рублей.
  • До 10 антител – от 15000 рублей.

Суть и возможности метода

При наличии в организме онкологического процесса, в кровь попадают антигены. Их наличие указывает на патологию, а конкретный тип на место локализации новообразования. С его помощью можно более точно поставить диагноз и определиться с эффективностью лечения.

Суть исследования заключается в выявлении антигенов, что возможно посредствам проведения ряда тестов. Используются реактивы, в состав которых входят «меченые» антитела. Эти белковые структуры имеют определенный цвет, который придают им специализированные красители.

Антитела способны выискивать антигены и вступать с ними в связи. Подобная реакция называется «антиген-антитело», когда с помощью меченых клеток удается определить наличие антигенов, указывающих на наличие злокачественного опухолевого процесса.

С помощью иммуногистохимического исследования можно выявить не только наличие онкогенных маркеров, но и определить некоторые рецепторы к гормонам, что эффективно при гормонозависящем типе опухоли или прогрессирующих эндокринных заболеваниях.

Результаты исследования показывают:

  1. Гистологическую принадлежность опухоли, что подтверждает или опровергает наличие рака.
  2. Локализацию опухолевого процесса и органы-мишени, которые в дальнейшем пострадают – это позволяет максимально направить все методы лечения на подавление патологического процесса именно в конкретном участке тела.
  3. Возможную методику лечения и резистентность клеток к определенным видам медикаментов. Врач может прогнозировать, насколько эффективным будет тот или иной препарат для конкретного пациента. Это минимизирует риски развития побочных воздействий и отсутствие терапевтического эффекта.

Иммуногистохимия является самым достоверным исследованием, которое помогает определить тип раковых клеток. Уровень погрешности минимален, что указывает на высокую точность результатов.

Иммуногистохимия очень точно определяет тип раковых клеток

Неоспоримым преимуществом иммуногистохимии является точное выявление типа рака и места его локализации (очага). Выявить это никакими другими сверхточными методиками невозможно. Именно окрашивание образца биоматериала показывает, какие клетки имеются в опухоли, как они себя ведут, и как будет вести себя при воздействии на них определенных способов лечения.

Диагностика, основанная на химической реакции, помогает выявить опухолевый процесс на самых ранних стадиях. Это увеличивает шансы на благоприятный исход.

На точность результатов влияют некоторые внешние факторы, в том числе и прием гормональных препаратов. За несколько дней до проведения биопсии показан отказ от всех лекарств, диета и отсутствие физических нагрузок. Невыполнение этих рекомендаций увеличивает риск появления неточностей в результатах исследования. При желании анализ можно сдавать в двух лабораториях одновременно, что снизит вероятность погрешности.

Инвазивная карцинома молочной железы

Диагноз инвазивного рак устанавливается только под микроскопом — на основании признаков прорастания опухолевыми клетками базальной мембраны и врастания в соединительную ткань, в которой проходят сосуды (лимфатические и кровеносные).

Инвазивная карцинома может быть протоковой и дольковой.

Прорастание опухолью базальной мембраны увеличивает риски метастазирования: в лимфатические узлы — при прорастании опухолью лимфатических сосудов; в другие органы (лёгкие, печень, кости) — при прорастании кровеносных. Поэтому при инвазивном раке чаще назначают химиотерапию.

Если при таком раке нет признаков поражения лимфатических узлов (по УЗИ, КТ, МРТ, ПЭТ или клинически) — при операции показана биопсия сторожевых лимфатических узлов. Если же пораженные узлы были выявлены — назначается химиотерапия или гормонотерапия для исчезновения метастазов в лимфатических узлах и при операции также выполняется биопсия сигнальных узлов.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Adblock
detector